| Brand | BIOCODE |
| Cat. No. | BCS-PR40003 / BCS-PR40002 |
| Application | Native-PAGE, SDS-PAGE, and Western blot transfer in Tris-Glycine systems |
| Package | 1 L, 10× Concentrate |
| Synonyms | TG buffer, TGS buffer, Tris-Glycine buffer, Tris-Glycine-SDS buffer, Native-PAGE running buffer, SDS-PAGE running buffer, protein electrophoresis buffer, Western transfer buffer, Tris-Glycine transfer buffer, Wet transfer buffer, 웨스턴블랏 트랜스퍼 버퍼 |
Features
TG와 TGS, SDS 유무에 따라 선택하세요
BCodePro™ TG/TGS Running Solution은 Tris-Glycine PAGE system을 위한 10× Running Buffer입니다.
SDS가 포함된 BCodePro™ TGS (Tris-Glycine-SDS) Running Solution는 SDS-PAGE에, SDS가 없는 BCodePro™ TG (Tris-Glycine) Running Solution는 Native-PAGE 또는 methanol을 첨가하여 transfer (blotting)에 사용합니다.
Gel 자체에 SDS가 포함되어 있지 않더라도 SDS Sample Buffer와 TGS Running Buffer를 함께 사용하면 denaturating SDS-PAGE를 진행할 수 있습니다.
BC-PAGE는 동일한 gel에서 Sample Buffer와 Running Buffer의 조합을 바꿔 Native-PAGE와 SDS-PAGE에 모두 사용할 수 있습니다.
TG (SDS-free): Native-PAGE, Transfer (10-20% methanol 첨가)
TGS (Contains SDS): Non-reducing / Reducing SDS-PAGE
같은 단백질도 전기영동 조건에 따라 다르게 보입니다
SDS와 환원제의 유무에 따라 단백질 구조와 subunit 결합 상태가 달라지며, 그 결과 전기영동 band pattern도 달라질 수 있습니다.
Orange line: Disulfide bond (S–S)
※ 원리 이해를 위한 예시 모식도입니다. 실제 band의 위치와 개수는 단백질의 특성과 실험 조건에 따라 달라질 수 있습니다.
LAB NOTE | IgG로 보는 Non-reducing과 Reducing의 차이
Non-reducing과 reducing 조건에서 밴드 패턴의 차이가 크지 않은 단백질도 많습니다. 이 차이가 가장 직관적으로 나타나는 대표적인 예가 IgG antibody입니다.
IgG는 약 50 kDa의 heavy chain 2개와 약 25 kDa의 light chain 2개가 disulfide bond로 연결된 약 150 kDa의 단백질입니다. 환원제가 없는 Laemmli sample buffer를 사용한 non-reducing 조건에서는 disulfide bond가 유지되어 약 150 kDa 부근에서 band가 나타납니다.
반면, sample buffer에 DTT 등 환원제를 첨가한 reducing 조건에서는 disulfide bond가 끊어져 약 50 kDa의 heavy chain과 약 25 kDa의 light chain으로 나뉘어 나타납니다.
* Non-reducing과 reducing SDS-PAGE는 동일한 PAGE gel과 SDS가 포함된 TGS Running Buffer를 사용하며, 차이는 sample buffer의 환원제 유무입니다.
PAGE 조건별 Sample Buffer & Running Buffer 선택 가이드
세 조건은 Running Buffer만 다른 것이 아니라 Sample Buffer의 조성과 가열 등의 조건이 달라집니다.
| 조건 | Sample Buffer | 가열 | 단백질 상태 | Running Buffer |
|---|---|---|---|---|
| Native-PAGE | SDS 없음 환원제 없음 | 보통 가열하지 않음 | 고유 구조와 전하, 비공유성 단백질 complex를 비교적 유지 | TG (Tris-Glycine) |
| Non-reducing SDS-PAGE | SDS 있음 환원제 없음 | 실험 조건에 따라 가열 | SDS에 의해 단백질은 변성되고 비공유성 결합은 대부분 해리되지만, disulfide bond는 유지 | TGS (Tris-Glycine-SDS) |
| Reducing SDS-PAGE | SDS 있음 환원제 있음 | 일반적으로 가열 | SDS에 의해 단백질이 변성되고 disulfide bond까지 끊어져 각 polypeptide chain으로 분리 | TGS (Tris-Glycine-SDS) |
* 환원제는 Dithiothreitol (DTT), β-mercaptoethanol (β-ME), TCEP 등을 사용 가능합니다.
* 본 가이드는 Tris-Glycine PAGE system을 기준으로 작성되었습니다. Tris-Tricine, Bis-Tris 등 다른 gel 조성을 사용하는 경우에는 해당 system에 적합한 sample buffer와 running buffer를 사용하십시오.
Specifications
| BCodePro™ 10× TG Running Solution | BCodePro™ 10× TGS Running Solution | |
|---|---|---|
| Composition (10×) | 250 mM Tris, 1.92 M Glycine, SDS-free | 250 mM Tris, 1.92 M Glycine, 1% SDS |
| Working Concentration (1×) | 25 mM Tris, 192 mM Glycine | 25 mM Tris, 192 mM Glycine, 0.1% SDS |
| Application | Native-PAGE, Wet transfer buffer preparation | Non-reducing and Reducing SDS-PAGE |
| Concentration | 10× | 10× |
| Dilution | For PAGE: Dilute 10× concentrate to 1× with DW For transfer: Prepare 1× TG with 10–20% methanol in the final volume according to the protocol | Dilute 10× concentrate to 1× with DW |
| Package Size | 1 L | 1 L |
| Storage | Room temperature (RT) | Room temperature (RT) |
| Shelf Life | 2 years | 2 years |
Ordering Info
| Code No. | Product | Unit |
|---|---|---|
| BCS-PR40003 | BCodePro™ 10× TG Running Solution | 1 L |
| BCS-PR40002 | BCodePro™ 10× TGS Running Solution | 1 L |